拉克罗斯病毒和雪靴野兔病毒双重RT-PCR方法的建立

摘要：目的 建立针对拉克罗斯病毒（LAC）和雪靴野兔病毒(SSH)的双重RT-PCR检测方法。方法分别针对LAC和SSH病毒的S基因设计2对特异性引物，建立同时检测LAC和SSH的双重RT-PCR方法。以黄病毒属的黄热病毒（YFV）、库京病毒（KUNV）、登革病毒（DENV）、乙型脑炎病毒（JEV），布尼亚病毒属的塔希纳病毒（TAHV）和甲病毒属的巴马哈森林病毒（BFV）、玛雅罗病毒（MAYV）、盖塔病毒（GETV）为模板验证方法的特异性，以不同拷贝数的病毒RNA检测该方法的敏感性。结果建立的双重RT-PCR方法能同时扩增到LAC和SSH的目的片段；敏感度分别达到LAC 1.41×105copies/μl，SSH 5.6×104 copies/μl；与YFV、KUNV、BFV、MAYV无交叉反应。结论建立了双重RT-